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研究发现超越传统,解锁新可能:流式多色分选新时代

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发表于 2024-10-1 04:33:48 | 显示全部楼层 |阅读模式

流式细胞分选作为一种广泛应用于生物医学研究领域的先进技术,不仅可以为细胞功能、表型、状态等多个方面提供详细的信息,还能够对复杂细胞群进行高效筛选。在流式细胞分选中,首要前提是区分不同的细胞,其次是对目标细胞进行分离。灵敏度是关键因素之一,尤其在需要对多个细胞亚群进行区分的情况下,如何在保持高分选效率和得率的同时提高细胞群之间的区分度成为了一个重要的问题。


增加分析维度更好区分不同细胞

通过增加流式细胞术的分析维度,研究人员可以更加精细地区分不同细胞亚群。生物体内的细胞是非常复杂且多样化的,不同类型的细胞可能在表面标志物、内部分子表达等方面存在细微差异。因此,通过增加流式细胞术中可以检测的颜色数量,可以在同一细胞中标记并检测更多的特定标志物,从而更好地区分不同细胞亚群。

通过增加分析维度,流式细胞术可以同时检测多个生物分子或细胞标志物,从而提供更全面、更详细的信息。这有助于研究人员更准确地识别和分类细胞亚群,尤其是在复杂的生物样本中,如免疫细胞混合物、肿瘤组织等。例如,在免疫学研究中,通过使用多色流式细胞术,可以同时检测多个表面标志物和内部分子,从而更好地鉴定和分析不同类型的免疫细胞亚群,如不同亚型的T细胞、活化状态的免疫细胞等,从而深入研究其功能和活性。



通过增加分析的维度,可以更好的区分不同细胞亚群。

此外,通过增加流式细胞术的分析维度,还可以更好地了解细胞在不同生物学状态下的变化。例如,在细胞分化和发育过程中,细胞可能会表现出不同的表型和功能,通过多色流式细胞术可以同时检测多个标志物,从而更全面地研究细胞的分化状态、细胞亚群的表型多样性等。
因此,通过增加流式细胞术中可以检测的颜色数量,可以提高细胞鉴定和分类的准确性,更好地区分不同细胞亚群,并深入了解细胞的复杂生物学特性和功能。这对于生物医学研究和临床应用具有重要意义。

然而,随着多色流式的应用,也面临着一个新的问题,那就是荧光染料之间的光谱重叠和荧光补偿的需求。不同荧光染料之间的光谱重叠会导致信号叠加,影响细胞的准确分类。而荧光补偿则是一种通过对样本进行单染色控制,校正多色流式分选中染料间的光谱重叠的方法。


科技创新,提升荧光检测灵敏度

CytoFLEX SRT利用CytoFLEX光学平台的技术势,让大家可以使用流式分析仪的灵敏度进行流式分选。不仅轻松的提升每个通道的荧光灵敏度,使得染色指数Stain Index(SI)提高,同一样本相对传统流式分群更加清晰与明显。Stain Index(SI)与流式分选画门之间的关系是,SI越大,说明荧光标记物在目标细胞亚群和非目标细胞亚群之间的荧光信号强度差异越大,更有助于准确设置分选门,提高分选效果的准确性和纯度。



CytoFLEX SRT 使用的APD技术相较于传统PMT技术光电转换效率更高,荧光扩散更低,提升荧光检测灵敏度。

补偿库轻松应对多色分选

流式分选的验时间,不经体现了时间就是金钱,更加重要的是过长的分选时间也会降低分选的细胞的细胞活性。那么如何兼顾检测参数化与降低分选方案调节时间呢
在这个背景下,CytoFLEX SRT补偿库功能作为一种先进的自动补偿调节工具,为多色流式分选提供了强有力的帮助。CytoFLEX SRT补偿库功能可以根据际荧光染料组合,自动计算和调整荧光补偿参数,需复杂的手工操作,从而简化了验流程,提高了验的可靠性和一致性。

而当我们化了新的采集增益值,也需反复利用新的增益值去记录单染管,大大提高了分选方案化效率。此外,CytoFLEX SRT补偿库功能还可以避免了手工补偿过程中可能出现的人为误差,提高了验结果的可靠性和稳定性。



补偿库轻松应对不同增益收集的荧光信号,一键校准,高效准确。

CytoFLEX SRT多色流式分选竟然如此简单

曾经传统的流式分选技术被卷入了“军备竞赛”般的竞争中,导致需要不断增加激光器和荧光通道远远超出客户日常验际需求。然而,在这种配置下,客户不仅需要支付更高的购买和维护费用,而且在进行多色验分选时还会遇到重重困难。CytoFLEX SRT提供了比较高配置的4个激光和15个荧光通道,经过化的配置,客户可以充分利用每个荧光通道,精确定义目标细胞群体。



CytoFLEX SRT进行15色分选验的配色方案与结果图。

此外,CytoFLEX SRT还可以直接迁移CytoFLEX分析仪上的数据与方案。通过前期在分析仪上的研究对多个细胞亚群进行更精确的区分,速迁移至CytoFLEX SRT平台,分选到目标细胞亚群,进一步深入研究细胞群的功能、表型和状态等特性,从而为生物医学研究提供更加丰富和详细的数据。



值得注意的是,多色流式分选中的灵敏度升级并不仅仅局限于荧光补偿的应用。随着流式细胞分选技术的不断发展,还涌现出了许多其他的灵敏度升级技术,如光学参数化、抗体标记化、流式细胞术后处理等。这些技术的不断推陈出新,为多色流式分选的高效施提供了更多的可能性。


CytoFLEX SRT打破了传统分析与分选之间灵敏度差异的界限,随着多色流式分选的荧光灵敏度升级提升,为生物医学研究提供了更加准确和可靠的细胞分类方案。而CytoFLEX SRT补偿库功能作为一种先进的自动补偿调节工具,为多色流式分选带来了很多好处,简化了验流程,提高了验效率和结果的准确性。在未来的研究中,多色流式分选和灵敏度升级技术将继续发挥重要作用,推动生物医学研究的进一步发展和突破。

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